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오염 후 컬럼을 어떻게 세척하고 재생합니까?
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오염 후 컬럼을 어떻게 세척하고 재생합니까?

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Date:2021-11-25 16:42:09 Thursday
Summary: 크로마토그래피 컬럼이 오염되면 크로마토그래피 거동은 오염되지 않은 컬럼과 약간 다릅니다. 컬럼이 오염되면 배압 문제가 발생할 수 있습니다. 오염된 역상 컬럼은 원래 작동 조건을 복원하기 위해 세척 및 재생되어야 합니다. 오염된 HPLC 컬럼을 재생하는 핵심은 오염물질의 특성을 파악하고 이를 제거할 적절한 용매를 찾는 것입니다. 반복 주입 중 강하게 잔류하는 물질이 축적되어 오염이 발생한 경우 이러한 오염 물질을 제거하기 위한 간단......

크로마토그래피 컬럼이 오염되면 크로마토그래피 거동은 오염되지 않은 컬럼과 약간 다릅니다. 컬럼이 오염되면 배압 문제가 발생할 수 있습니다. 오염된 역상 컬럼은 원래 작동 조건을 복원하기 위해 세척 및 재생되어야 합니다.
오염된 HPLC 컬럼을 재생하는 핵심은 오염물질의 특성을 파악하고 이를 제거할 적절한 용매를 찾는 것입니다. 반복 주입 중 강하게 잔류하는 물질이 축적되어 오염이 발생한 경우 이러한 오염 물질을 제거하기 위한 간단한 단계를 통해 크로마토그래피 동작을 복원할 수 있습니다. 때로는 여러 작업 후에 크로마토그래피 컬럼을 90-100% 용매 B(2-용매 역상 시스템에서 더 강한 용매)로 20배 세척하여 오염 물질을 제거합니다. 예를 들어, 메탄올, 아세토니트릴 및 테트라히드로푸란과 같은 비수성 용매는 컬럼의 잔류 지질에 사용할 수 있습니다.

일반적으로 모든 청소 방법은 유사한 형태를 가지고 있습니다. 사용된 용매는 용매 강도에 따라 증가합니다. 종종 마지막 용매는 매우 소수성(에틸 아세테이트 또는 탄화수소와 같은)이며 지질 및 오일과 같은 비극성 물질을 용해하는 데 사용할 수 있습니다. 일련의 용매에 있는 각 용매가 다음 용매와 혼합될 수 있는지 확인해야 합니다.
세척 과정이 끝나면 중간 강도의 혼화성 솔벤트를 사용하여 원래 솔벤트 시스템으로 돌아가야 합니다. 예를 들어, 이소프로판올은 n-헥산 또는 디클로로메탄 및 수상 용매와도 혼화되기 때문에 중간 단계로서 매우 우수한 용매입니다. 그러나 이소프로판올의 점도는 매우 높으며 과도한 펌프 압력을 피하기 위해 낮은 유속을 확보해야 합니다. 크로마토그래피 컬럼을 세척할 때 세척액은 크로마토그래피 컬럼의 출구 끝에서 폐기물 병에 직접 연결되며 탐지 셀의 오염을 피하기 위해 탐지 셀을 통해 흐를 수 없습니다.
역상 크로마토그래피 컬럼은 완충액을 사용하지 않습니다. 다음 용매 시리즈를 사용하여 재생하십시오.
100% 메탄올 → 100% 아세토니트릴 → 75% 아세토니트릴-25% 이소프로판올 → 100% 이소프로판올 → 100% 염화메틸렌 → 100% n-헥산 → 100% 염화메틸렌 → 100% 이소프로판올 → 100% 아세토니트릴 .
역상 크로마토그래피 컬럼은 완충 용액을 사용합니다. 다음 용매 시리즈를 사용하여 재생하십시오.
물 → 아세토니트릴 → 클로로포름(또는 이소프로판올) → 아세토니트릴 → 물.
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